免疫組化多聚甲醛配制_溶液_粉末_注意事項

摘要：

免疫組化實驗中多聚甲醛配制

于免疫組化〔IHC〕實驗中，固定劑選擇對實驗結果至關很大。多聚甲醛〔PFA，Polyformaldehyde〕因其優良組織保存能力、抗原保持能力，是目前最常用固定劑。以下是多聚甲醛溶液配制步驟、注意事項。

配制步驟：

1. 準備材料：準備好所需材料，包括多聚甲醛粉末、去離子水或蒸餾水、氫氧化鈉〔NaOH〕、燒杯、磁力攪拌器還有pH計。

2. 溶解多聚甲醛：將適量多聚甲醛粉末加入到一定量去離子水中。通常狀況下，會配置4%多聚甲醛溶液，這意味著每100毫升水中要加入4克多聚甲醛。為了促進溶解，可以先用少量熱水濕潤多聚甲醛粉末。

3. 添加氫氧化鈉：于加熱至60℃左右時，緩慢向溶液中加入氫氧化鈉以幫助多聚甲醛完全溶解。注意控制溫度不要過高，避免破壞蛋白質結構。

4. 調整pH值：當溶液變為透明后，使用pH計檢測其酸堿度，理想pH范圍應該接近7.4。如果pH不符合要求，則可通過繼續添加氫氧化鈉來調節。

5. 過濾和儲存：最后通過微孔濾膜過濾去除不溶性顆粒，并將其存放于陰涼避光處備用。新鮮配制溶液效果最佳，但也可以冷藏保存幾天。

注意事項：

操作過程中必須佩戴手套、防護眼鏡，因為多聚甲醛具有一定毒性。
避免直接接觸皮膚、眼睛，如果不慎濺入，請立即用大量清水沖洗并尋求醫療幫助。
配置完成后應盡快使用，長時間存放也許會導致性能下降。
不同類型樣本也許要調整固定時間及濃度，因此建議根據具體需求進行適當修改。

通過以上方法正確配制出高質量多聚甲醛溶液，能夠很好增強免疫組化成功率、準確性。