多聚甲醛固定的原理_細胞_蛋白質_樣本_效果

摘要：

多聚甲醛固定原理

于生物化學、細胞生物學還有免疫學行業，固定劑選擇對于實驗結果至關很大。多聚甲醛〔Paraformaldehyde, PFA〕作為一種常用組織固定劑，其固定機制主要基于其交聯作用、蛋白質變性能力。知道多聚甲醛固定原理有助于更好優化實驗條件并增強檢測效果。

多聚甲醛是一種無色固體，加熱后會釋放出甲醛氣體。當甲醛和待固定樣本接觸時，它能夠迅速穿透細胞膜進入細胞內部。于此過程中，甲醛通過以下幾種方式實現固定：

1. 蛋白質交聯：甲醛分子中碳氧雙鍵可以和蛋白質分子中氨基〔如賴氨酸殘基ε氨基〕有反應，形成亞甲基橋〔CH2〕，從而將相鄰氨基酸殘基連接起來。這種交聯不僅穩固了蛋白質結構，還減少了蛋白酶降解也許性。

2. 核酸固定：除了蛋白質外，多聚甲醛還能和DNA、RNA中磷酸基團相互作用，降低核酸流動性，防止于后續處理中丟失或擴散。

3. 細胞形態保持：通過上述化學反應，多聚甲醛能很好鎖定細胞內很多成分，包括細胞骨架、細胞器，和此同時維持細胞整體形態。

4. 抗原暴露：適當濃度多聚甲醛既能充分固定樣本，又不會過度破壞抗原表位，因此常用于免疫組化、免疫熒光實驗中。

要注意是，多聚甲醛固定效果受許多因素影響，如溫度、時間、pH值及樣本類型。過高濃度或過長時間也許導致樣本過度硬化甚至損傷抗原表位；而濃度過低則也許無法達到理想固定效果。因此，于實際用途中需根據具體需求調整參數，以獲得最佳固定效果。