pfa多聚甲醛固定步驟_樣本_溶液_組織學
發布時間：2025-05-27 22:00來源：原創
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摘要：
多聚甲醛〔PFA〕是一種常用組織學固定劑，大量用途于免疫組化、原位雜交實驗中。其主要成分是多聚甲醛，通過甲醛聚合形式發揮固定作用。以下是PFA多聚甲醛固定步驟：
，準備1%至4%濃度PFA溶液。通常狀況下，實驗室會使用2%PFA作為標準濃度。將多聚甲醛粉末精確稱量后，溶解于預熱至6070℃磷酸緩沖液〔PBS〕或蒸餾水中。為了確保多聚甲醛完全溶解，可以輕輕攪拌或加熱至溶液澄清透明。于此過程中，需避免過度加熱，以免破壞組織樣本。
接下來，將待固定組織樣本用PBS清洗干凈，并去除多余血液或其他雜質。然后將組織樣本放入適當容器中，倒入已制備好PFA溶液，確保溶液完全覆蓋組織。固定時間根據樣本類型、實驗需求而定，一般為4到24小時。于此期間，應將樣本置于4℃環境中，以減緩化學反應速度并保護組織結構。
固定完成后，用PBS多次沖洗樣本，以去除殘留PFA溶液。沖洗后樣本可進行后續處理，如脫水、透明化、包埋步驟。于整個操作過程中，務必佩戴手套、防護眼鏡，避免直接接觸PFA溶液，以防皮膚刺激或腐蝕。
PFA多聚甲醛固定是組織學研究中關鍵步驟，正確固定方法能夠很好保持組織形態、抗原性，為后續實驗提供可靠基礎。
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