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      多聚甲醛固定細菌_細胞_蛋白質_溶液_措施

      發布時間:2025-06-08 21:52來源:原創 幫助了78人
      摘要:
      多聚甲醛〔PFA〕是一種常用化學固定劑,大量用途于生物學、醫學研究中。它通過交聯蛋白質、其他生物分子來穩固細胞結構,常用于固定細菌以進行形態學觀察或免疫熒光實驗。

      于固定過程中,多聚甲醛要溶解于水中形成4%溶液。然后將新鮮采集細菌樣本置于該溶液中,于室溫下靜置1530分鐘。于此期間,多聚甲醛會和細菌細胞表面及內部蛋白質有反應,形成穩固交聯網絡,從而保持細菌原有形態特征不變。為了確保固定徹底性,有時還要增強溫度至37℃左右繼續孵育一段時間。

      固定完成后,要用PBS緩沖液多次洗滌樣品以去除殘留多聚甲醛,并避免后續操作時對細胞引發毒性影響。如果計劃開展免疫熒光分析,則還需進行透化處理以便抗體能夠進入細胞內部識別目標抗原。

      使用多聚甲醛固定細菌具有優良保存效果,不僅能夠一直維持其原始狀態,還便于許多顯微鏡技術如共聚焦顯微鏡用途。不過要注意是,因為多聚甲醛也許引起某些敏感個體過敏反應,于操作時應做好個人防護措施并確保優良通風條件。另外,廢棄固定液必須按照相關規定妥善處置以免造成環境污染。
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