4%多聚甲醛固定_樣本_細胞_生物_蛋白質
發布時間:2025-06-08 21:58來源:原創
幫助了55人
摘要:
多聚甲醛固定是一種常用生物樣本處理技術,大量用途于組織學、細胞生物學還有免疫熒光行業。該方法通過將多聚甲醛〔PFA〕和生物樣本接觸,利用其交聯作用使蛋白質、核酸生物大分子穩固下來,從而保存樣本結構特征。
,于進行多聚甲醛固定之前,要準備好適當濃度多聚甲醛溶液。通常狀況下,實驗室中使用多聚甲醛固定液為4%濃度,即每100毫升蒸餾水中溶解4克多聚甲醛。于配制過程中,需確保操作環境通風優良,并佩戴適當個人防護裝備,如手套、護目鏡,以避免吸入或直接接觸有害物質。
接下來是具體固定步驟。將待固定組織塊或細胞樣品放入適量4%多聚甲醛固定液中,確保樣本完全浸沒其中。然后將其置于室溫下靜置一段時間,一般為15至20分鐘。于此期間,多聚甲醛會通過化學反應和蛋白質中氨基有交聯,形成穩固網狀結構,很好防止樣本內部成分降解。對于某些特殊類型樣本,也許還要調整固定時間或溫度條件。
完成固定后,應立即用緩沖液〔例如PBS磷酸鹽緩沖液〕徹底清洗樣本,去除殘留多聚甲醛,以免影響后續實驗結果。另外,于整個操作過程中,必須遵守無菌操作規范,防止污染,和此同時妥善處置廢棄物,遵循環保要求。
4%多聚甲醛固定是一種簡單而很好樣本預處理手段,能夠顯著增強后續分析質量、可靠性。無論是研究細胞形態還是檢測特定蛋白表達水平,這一技術都發揮著不可替代作用。
以上關于4%多聚甲醛固定_樣本_細胞_生物_蛋白質的內容對您是否有幫助?